
主營產(chǎn)品:
生化試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,對照品,PCR試劑盒,?核酸檢測試劑盒,熒光定量檢測試劑盒,生化試劑盒?,比色法試劑盒,酶活性檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免yi檢測試劑盒,試劑盒,ELISA試劑盒,抗體,重組蛋白,分光光度法檢測試劑盒,細(xì)胞株,原代細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)基,標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
解決qPCR無Ct信號出現(xiàn)現(xiàn)象
日期:2025-06-07 06:12
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摘要:
解決qPCR無Ct信號出現(xiàn)現(xiàn)象:
1、反應(yīng)循環(huán)參數(shù)不夠,一般要在35個循環(huán)以上,但是過多的循環(huán)次數(shù)可增加背景值。
2、檢測熒光信號的步驟有誤。SYBRgreen法(SG法)采用的是72延伸時采集熒光信號,taqman法則是在退火結(jié)束或延伸結(jié)束時進(jìn)行信號采集。
3、引物或探針降解,可用PAGE電泳檢測其完整性,若是電泳條帶呈彌散狀,可考慮重新合成引物或探針。
4、模板不足或降解,則可以重新提取核酸模板。
解決qPCR無Ct信號出現(xiàn)現(xiàn)象:
1、反應(yīng)循環(huán)參數(shù)不夠,一般要在35個循環(huán)以上,但是過多的循環(huán)次數(shù)可增加背景值。
2、檢測熒光信號的步驟有誤。SYBRgreen法(SG法)采用的是72延伸時采集熒光信號,taqman法則是在退火結(jié)束或延伸結(jié)束時進(jìn)行信號采集。
3、引物或探針降解,可用PAGE電泳檢測其完整性,若是電泳條帶呈彌散狀,可考慮重新合成引物或探針。
4、模板不足或降解,則可以重新提取核酸模板。