產品詳情
  • 產品名稱:兔腎小球內皮細胞

  • 產品型號:
  • 產品**:撫生
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簡單介紹:
兔腎小球內皮細胞公司正在出售的產品:NCI-H524人非小細胞肺癌細胞 G蛋白偶聯(lián)受體LOC51210蛋白抗體 CG ELISA Kit 甘膽酸檢測試劑盒 FK506結合蛋白38抗體 人T細胞白血病細胞;JM
詳情介紹:

培養(yǎng)方法與步驟:


①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。

⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。




產品名稱

兔腎小球內皮細胞

產品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

組織來源

生長特性

貼壁

細胞形態(tài)

內皮細胞樣

分類

原代細胞

貨號

A01X2081

用途

僅供科研實驗

培養(yǎng)信息:


包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態(tài):內皮細胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

兔腎小球內皮細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞簡介:

兔腎小球內皮細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是**尿液,借以體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有功能,**腎素、促紅細胞**素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分的降解場所和腎外的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾**原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內,微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內皮細胞是一類特殊微血管類型的細胞。細胞為圓形、多角形,單層貼壁生長;細胞質豐富,細胞核為圓形或卵圓形。腎小球內皮細胞被覆于腎小球壁腔側,與血流直接接觸,是腎小球濾過膜的道屏障,可粘附和白細胞,修復基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,體外培養(yǎng)的腎小球內皮細胞在學和病理生理學領域中具有重要的研究價值。

方法簡介

實驗室分離的兔腎小球內皮細胞采用先機械研磨過不銹鋼網篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化,結合內皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔腎小球內皮細胞經CD31熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、、酵母和等。

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原代細胞步驟


1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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